永利集团

  　克日，永利集团(国家生物信息中心)杨运桂研究员、中国农业大学韩建永教授、永利集团(国家生物信息中心)杨莹副研究员和郑州大学第一隶属医院孙莹璞教授以配合通讯作者在Nature Communications 杂志上揭晓了题为“scm⁶A-seq reveals single-cell landscapes of the dynamic m⁶A during oocyte maturation and early embryonic development”的研究论文。该研究使用多重标记团结m⁶A-RIP-seq手艺原理，开发了单细胞m⁶A测序手艺（scm⁶A-seq）, 并绘制了卵母细胞成熟和早期胚胎发育历程的单细胞区分率m⁶A图谱。

　　scm⁶A-seq手艺实现了单细胞内转录组和m⁶A甲基化组的同时测序（图1），在单个小鼠卵母细胞中可检测到凌驾一万个基因的表达，判断的m⁶A修饰区域泛起经典的RRAC守旧基序特征，且手艺重复性优异。通过与公共数据较量，该手艺可在筛选到卵母细胞中守旧的m⁶A修饰特征的同时，保存单细胞中的异质性修饰特征。

图1. scm⁶A-seq测序要领和本研究获得的数据集

　　使用scm⁶A-seq对Mettl3敲除小鼠的卵母细胞RNA举行测序，发明Mettl3敲除的小鼠卵母细胞中m⁶A水平降低，同时METTL3依赖的m⁶A修饰基因在METTL3敲除的卵母细胞中泛起异�；�。团结表达和m⁶A修饰特征进一步区分了高质量的卵子(SN)和低质量的卵子(NSN)（图2）。

图2. scm⁶A-seq区分SN和NSN卵母细胞

　　对差别减数破碎阶段的卵子举行单细胞m⁶A测序，发明减数破碎恢复后m⁶A水平会泛起显着上升，泛起动态性修饰特征。团结对早期胚胎发育历程的单细胞m⁶A数据，发明m⁶A修饰的转录本在次级卵母细胞到合子转变时代会越发稳固，而在Mettl3敲除的卵母细胞到合子的发育中，修饰转录本泛起不稳固性降解，提醒在卵母细胞到合子发育时代m⁶A稳固母源修饰RNA的作用。在早期胚胎(合子到4细胞)发育历程中，发明2细胞胚胎的两个卵裂球会泛起基因组激活差别步征象，并判断到差别性m6A修饰的转录因子。

　　综上，scm⁶A-seq手艺实现了单细胞中m⁶A甲基化组和转录组的同时测序。使用scm⁶A-seq手艺，判断出了高质量卵母细胞(SN)和低质量(NSN)卵母细胞，提醒scm⁶A-seq手艺具备更准确判断单细胞亚群的潜力。

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